灭菌将置好监测物的凡士林纱布盒与其它待消物品一起放入脉动真空蒸汽灭菌器内，脉动次数选择为3次，灭菌时间为6min，灭菌温度为132°c～134°c，压力为0.19mpa～0.21mpa，按灭菌操作程序进行灭菌。取样、培养、结果观察先清洁消毒质检室和净化工作台，将灭菌后的被检样品盘、培养基、取样器械包置于净化工作台中，紫外线照射30min后，操作者更衣、洗手、戴口罩帽子、酒精棉球擦手，以无菌操作从每盘各点取出菌片置于培养液内，同时设阴、阳性对照管各1只，置于56°c恒温培养箱中培养72h观察结果；同时将留点温度计及化学指示卡取出观察结果并记录。
结果相同条件下，江苏真空泵凡士林纱布层次不同灭菌效果不同。从温度观察，盒内凡士林纱布越厚，其中层和下层的温度越低；从化学指示卡的变色程度看，20层/盒～40层/盒的上、中、下三点的变色均为均匀变黑，而60层一组的下点和80层一组的中点及下点的变色程度稍浅一些。以上结果提示凡士林纱布超过一定厚度就会阻碍温度和蒸汽的穿透效果。从菌片的培养结果看：除80层这一组的下层有两例培养液出现浑浊表示有菌生长不合格外，其余各组各点均为无菌生长。从以上试验结果得出：运用脉动真空蒸汽灭菌，凡士林纱布的厚度会影响灭菌效果。因此，对凡士林纱布的厚度要控制在60层以内，在此厚度内运用脉动真空蒸汽对凡士林纱布的灭菌效果是安全有效的，在临床可以放心使用。
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